猪苓纯菌种伴蜜环菌栽培技术

杨燕 李富得
（甘肃省陇南市农业科学研究所，甘肃陇南 746005）
《食用菌》2012.4

　　关键词 猪苓 蜜环菌 分离培养

　　近些年猪苓价格不断上涨，极大的刺激林区群众种植的积极性，种用菌核价格不断攀升，目前鲜重达到160元/kg左右，许多想种猪苓者望种兴叹；纯猪苓菌种伴蜜环菌栽培法也称“猪苓伴活树栽培法”，继猪苓菌核仿野生栽培技术后，这两年试验成功并推广的猪苓栽培新技术。在猪苓菌核不足的条件下，人工分离提纯，生产猪苓纯菌种作为猪苓种源，生产成本低，能迅速扩大种植规模，同时所产猪苓优质高产，能提高种植效益。现将其介绍如下。

　　1 猪苓纯菌种的分离培养

　　猪苓菌种同其它菌种一样，也是经过菌种分离（组织分离、孢子分离）而获得菌种，一般是采用野生或家种猪苓菌核分离或夏季雨后湿热天气采集猪苓子实体（俗称“猪苓花”或千层蘑菇）进行组织分离以及担孢子分离。
　　1.1 母种分离
　　1.1.1 制备培养基 采用PDA培养基或麸皮-葡萄糖培养基均可。①PDA培养基：马铃薯（削皮）200g，葡萄糖20g，琼脂12～15g，水1000mL，pH5.0～6.0。②麸皮-葡萄糖培养基：麸皮50g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁1.5g，琼脂l2～15g，水1000mL培养基的制作和灭菌与常规方法相同。
　　1.1.2 分离方法
　　1.1.2.1 组织分离法有菌核分离和子实体分离 菌核分离：猪苓菌子实体采集受季节、天气影响有诸多不便，获得菌种多采用菌核分离，将菌核表面洗净，用75%的酒精消毒后，切开菌核，取中间黄豆粒大小的1块组织，无菌条件下接种到试管斜面上，在15～20℃的适温下培养，产生菌丝后进行分离纯化。子实体分离：利用子实体内部组织进行分离，是获得优质菌种的最好方法。选择七八分成熟、性状优良的子实体做种菇，用无菌水冲冼几次，并用无水滤纸吸干，然后把种菇撕开，用消毒小刀在菌盖与菌柄交界处或菌褶处切取一小块组织，用接种针将组织放入装有培养基的试管斜面中间，适温培养，当组织块上产生菌丝，并向培养基四周生长时，即可挑取斜面上菌丝的生长点进行转管和纯化。
　　1.1.2.2 孢子分离法 孢子分离要选择成熟度高，将要散孢子的优良子实体做种菇，通常采用钩悬法进行孢子分离，将种菇消毒后，取成熟子实体菌盖的几片菌褶，用无菌不锈钢丝悬挂于三角瓶（或广口瓶）内的培养基上方，勿使它接触到培养基和四周瓶壁。将瓶置于20℃的恒温箱中培养，待成熟的孢子落到培养基上，立刻在无菌条件下移去菌褶，孢子继续在瓶中培养，当长出菌丝后进行转管培养。猪苓菌种分离培养必须组织分离和孢子分离交替进行，至少三年进行一次孢子分离恢复其种性，据笔者调查长期的无性繁育是猪苓减产的最主要原因之一。

　　1.1.3 菌种纯化培养 在平板培养皿或试管培养基上最初分离出的菌种，经过选择后再进行纯化培养，以获得质量优良的纯菌种。菌种的纯化操作同样在无菌条件下进行，当猪苓在培养基上产生齐头并进的菌丝时，立即用接种针挑取其中长势旺盛菌丝茎尖部分，置于斜面试管培养基中央，在20℃恒温下培养10d左右，当菌丝长满整个培养基时，便是纯菌种即母种。
　　1.2 原种、栽培种的培养 原种基本配方：杂木屑78%，麸皮20%，蔗糖1%，石膏1%，水分55%～60%。获得母种后，一般制种户就能生产猪苓原种，因猪苓菌丝生长较慢，菌丝纤细，宜用透明玻璃瓶生产原种，以便观察去杂。栽培种配方杂木屑58%，枝条20%，麸皮20%，蔗糖1%，石膏1%，水分55%～60%。采用12cm×28cm规格聚乙烯袋或聚丙烯袋装料，培养基中加入粗1～2cm，长2～5cm小枝条，每袋可加入枝条20～30支。缝隙用杂木屑填满。原种、栽培种培养料灭菌一定要彻底，必须在严格的无菌条件下接种，菌种培养过程中勤查勤看挑去带杂菌的菌种，为生产提供优良菌种。

　　2 蜜环菌的培养方法

　　将5cm左右粗的阔叶树柴棒锯成长30cm左右，砍上鱼磷口，用纯蜜环菌或无杂菌的旧菌棒培养新菌棒，方法是：铺一层5cm厚的湿沙，排放一层柴棒，将纯蜜环菌种的小枝条放在鱼磷口旁，盖上一层细沙，再排一层柴棒、菌种，一般三至五层；如果没有纯蜜环菌种，可用种过天麻的旧菌棒来培菌，对旧菌棒要求无腐烂、无杂菌，在湿沙中一般两根新棒中夹一根上旧菌棒即可。一般培养2月左右就可在生产中应用。

　　3 猪苓菌棒繁育

　　3.1 猪苓菌与蜜环菌同棒培养法 具体方法是选用直径4～6cm，长25～30cm杂木段，青冈、壳斗科木质最好，木段含水量50%～60%；木段两边各打深3mm，直径1.2～1.6mm的小孔，一边小孔塞纯猪苓菌种，一边小孔塞纯蜜环菌菌种，均加上盖皮，接蜜环菌的那排小孔朝下埋入含水60%左右湿沙内；接猪苓菌种的小孔朝上，裸露在空气中，上层覆盖农膜进行培养。
　　3.2 猪苓菌棒单独的培养法 具体方法是在棒上打孔塞上猪苓菌种加盖，也可砍上鱼磷口，将核桃大小的菌种块放在鱼磷口旁，埋入水分含量40%～50%沙内培养，在18～25℃条件下培养两个月左右，取出菌棒检查小孔口盖皮周围或鱼磷口边分别能见到猪苓菌丝，这时就可以上山栽种。

　　4 场地选择

　　选择适宜猪苓生长的场地对栽培成败、效益至关重要。一般低山区选择阴坡，高山区选择半阴半阳坡，腐殖层厚沙壤土的杂灌木林内最佳，分布有零星遮阳树，弃耕的二荒地也很适宜栽种猪苓。

　　5 栽培方法

　　找一株灌木丛或阔叶活树，树根下挖深20～30cm，长宽各50～80cm左右的穴坑。寻找出直径2～5cm的根系一至两条用利刃切断，坑底铺一指厚湿树叶；用3.1方法培好的两菌（蜜环菌、猪苓菌）菌棒两节，蜜环菌一侧对准断根处，每穴2～3根菌棒，然后覆盖树叶和细短树枝一层，覆土呈龟背形。采用3.2法培育的猪苓纯菌棒与蜜环菌棒栽培，蜜环菌棒对准断根处，猪苓菌棒与蜜环菌并排摆放，间隔2～3mm，隙缝填入树叶细短树枝，覆盖腐殖土呈龟背形；若用培养好的纯蜜环菌棒与纯猪苓三级种菌袋（菌种来代替猪苓菌棒）也可以，方法是蜜环菌棒对准断根处，菌种脱去塑料袋，将猪苓菌筒挨着蜜环菌并排摆放，一般每窝用蜜环菌菌棒2根，猪苓菌筒两节，隙缝填入树叶细短树枝，覆盖腐殖土呈龟背形；这样蜜环菌就寄生于活树根部，源源不断地为猪苓提供营养，供其生长。

　　6 管理方法

　　每年用周围落叶树枝，将栽培穴覆盖一次，如遇干旱，土壤水分不足40%，要洒水保持土壤湿度50%左右，栽后半年猪苓逐渐与蜜环菌建立共生营养关系，猪苓菌丝生长加快，可见菌核形成。一般栽后3～4年收获，每窝能收获7～10kg猪苓菌核。

　　7 采收

　　一般3年后就可采收。采挖方法很简单，用锹挖出猪苓菌核，并留少量与蜜环菌连接的菌核在土中，盖一层树叶和树枝后覆浅层土，猪苓可继续生长，仍用落叶和树枝，每年冬春覆盖原空穴一次，过4～5年后仍能收获3～10kg猪苓。
　　猪苓菌种，也可集约栽培，栽培方法可参照猪苓仿野生人工栽培方法操作，每窝用杂木材15kg，栽两层，常规管理3年后可采收6～8kg鲜苓。
　　总之，各地条件不同，应采用相应的栽培管理方法，但有一点必须认真对待，那就是要尽量营造一个适宜猪苓生长的外围条件，加上可靠的菌种方能成功