拌料
选好配方后，按照配方的要求加水拌料。在配料的过程中，要注意以下几点：
① 锯木屑要经过2～3目筛，除掉木块、木条、木片、霉料团等硬物。按照配方要求配料，用机器或人工充分拌匀。将糖类物质溶于水中，随水均匀拌入料内。要做到主、辅料均匀，干湿均匀，酸碱度 适宜，无生料团。
② 搞好环境卫生，拌料的场地最好是水泥地面，使用前要用水冲刷干净，尽量减少污染。
③ 灵活掌握含水量，对干料、细料加水宜多一些；对湿料、粗料加水宜少一些。在水泥场地拌料加水宜少一些，在干泥渗水场地拌料加水宜多一些，具体加水量以拌好料堆闷半小时后，用手紧握料有水从指缝渗出、但不成滴下落即可。
④ 操作要迅速，在气温高时（28℃以上时），如拌料至灭菌时间过长，则料易变酸。轻者影响发菌，重则不发菌。因此，要合理安排好生产量，保证在高温期从拌料到灭菌不超过4小时，在低温期从拌料至灭菌不要过夜。
装瓶与封口
所用菌种瓶要提前刷洗干净，控干后备用。木屑或棉子壳培养料装瓶，装料至瓶颈可用木棒压实、压平、料面须在瓶肩以下。然后要在料中间扎直径为1.5～2厘米的孔，将瓶口内外壁擦净。取一块完整、略大于掌心的棉絮卷成棉塞，棉塞要比瓶口略粗，稍用力即可旋入瓶口为宜。塞入瓶口2/3、外露1/3，棉塞头部,与瓶颈的底口平，要松紧适度。如过紧，会影响通气，发菌慢；过松不但棉塞易脱落，且起不到过滤杂菌的目的，容易引起杂菌的感染。塞好棉塞后，盖上牛皮纸或双层报纸，用皮筋扎紧。
灭菌
采用高压灭菌或常压灭菌。高压灭菌的压力通常为1.5～2千克/平方厘米，灭菌时间为2～2.5小时。常压灭菌需8小时以上。
接种
接种前必须使瓶温降至30℃以下，这样做可以防止高温接种时烫死菌种，有冷却室的在冷却室冷却，没有冷却室的可以直接在冷却室冷却。每支试管母种一般可以转接3～4瓶原种。接种前首先要把接种室或接种箱打扫干净，喷洒30倍的“菇老爷”牌金星消毒液或使用“随缘100烟雾弹杀菌剂”进行熏蒸处理，再把已经灭菌后的菌种瓶及其它用具都全部搬进去，然后按常规对接种室或接种箱进行严格的消毒处理。为了保证菌种的成活率，接种时一定要严格按照无菌操作进行。
具体操作方法是：接种者手持母种试管，用酒精棉球将试管内外擦干净后，拔出面色，试管口对准酒精灯火焰上方，用火焰烧一下管口，把烧过的接种勾迅速插入试管内壁冷却，将试管斜面前端1厘米长的菌丝块挖去，剩余的斜面分成3～4段，另外一个人在酒精灯的火焰上方，在接种者取好菌种块的同时拔开原种瓶棉塞，接种者将菌种块取出，快速接入原种瓶的接种穴内，棉塞过火焰后塞好。如此一支试管可接3～4瓶原种。每接完一支试管，接种勾要重新过火消毒，防止交叉感染。接完种后，立即将台面收拾干净，将各种残物如试管、洒落的培养基、棉塞等均需清理出室外，照前述方法进行第二轮接种。
培养
原种或栽培种培养时需要注意的事项：
首先要提前几天打扫培养室，对水泥地面、墙壁等进行清洗，并严格消毒处理后才可使用。培养室要求保持空气干燥、清洁、避强光，留有能启闭的通风口，要保证空气流通无死角。
将接种后的原种、栽培瓶或菌袋拌入培养室，保持温度在25℃左右，保持空气相对湿度在55%～65%。一般3～5天菌丝即可吃料，7～10天菌丝即可封面。待菌丝封面后，要加强通风换气，保持室内空气新鲜，一般培养25～35天菌丝即可长满瓶或袋。
培养期间要随时检查菌袋，发现有污染杂菌应及时采取措施。瓶或袋内杂菌滋生部位不同，其污染的原因也不同：如棉塞受潮，空气湿度过大时，瓶或袋口部位极易滋生红色或白色的链孢霉。如瓶或袋内上下均发生绿霉或毛霉等杂菌，则可能是灭菌不彻底。如随机发现接种块四周发生杂菌，则可能是接种操作不熟练或棉塞过松所致。如紧邻几瓶或袋的种块部位全部滋生杂菌，可能是母种带杂菌或接种工具灼烧不严所致。不管哪种情况，一旦发现杂菌危害后，必须及早清除，以防蔓延导致大批菌袋发生杂菌感染。初期污染的菌种瓶或菌袋可重新彻底灭菌，重新接种，不可延误。
菌袋除污染杂菌外，有时也会出现种块也不萌发的现象。其原因是：一是接种工具灼烧后未冷却就开始去挖取菌种块，菌丝被烫死或菌丝过火焰时被烧死。二是母种干缩、老化，失去了萌发力。三是培养温度不适宜，菌种瓶灭菌后未冷却，致使菌种受热而死。
有的菌种块虽能萌发，但却不吃料，其原因是：菌种块与培养料结合不紧密；培养料偏干；培养料的酸碱度不适宜；培养料内添加了过量的抗杂菌药物如多菌灵等。因此，接种时要使菌种块与培养料紧密结合；坚持随拌料随装瓶，及时灭菌防止培养料变酸；选用培养料木屑时要严防混入松柏类的木屑；配料时不要随意添加或过量添加一些抑菌药物，以防止菌丝生长受到抑制；要保持室内空气湿度为55%～65%；要远离热源，使种瓶受热均匀。
