食用菌接种室无菌操作及管理细则

　　为规范接种操作，提高接种成活率，特制定此细则，本细则适用于接种室接种操作人员，菌种室及相关人员参照执行。
　　1、接种室接种操作人员应有强的无菌操作意识，任何不规范或无意识的操作及行为都有可能给接种带来污染隐患，因此所有接种室操作及行为都应以此细则为标准执行，细则之外的操作及行为经咨询主管人员并经同意后方可用于接种作业，同时我们将根据实际情况对本细则进行补充和完善。
　　2、接种室、缓冲间的消毒
　　接种室为高度无菌区，每天接种前2.5～3小时时段必须对接种室进行较为严格的消毒处理,消毒之前所有接种所需物件、菌种等必须一次性准备到位。
　　2.1菌种消毒
　　挑选好的菌种在接种室开始消毒之前应对菌袋表面进行药浴消毒，消毒所用药品为0.1%高锰酸钾溶液,消毒时将菌袋浸入溶液中,并用抹布进行擦拭,袋壁、袋颈、袋口及棉塞等凡暴露于空气中的部位都应擦到，将擦洗完毕的菌种马上放到接种室即可以进行接种室的空间消毒作业。
　　2.2 接种室消毒方法
　　接种室消毒时臭氧机开机时间为2小时，同时点3大包菇保一号辅助消毒；缓冲间点5小包菇保一号进行熏蒸。接种室消毒开始时间为每天早上的5:00～5:15，下午为11:15～11:30,接种时间上午不晚于8:10，下午不晚于14:10。臭氧机关机时间将由时控开关自动控制，消毒人员不再进入缓种间手动关闭。
　　3、接种前准备
　　接种室、缓种间均采用统进统出方式，严禁分批及无序进出，进入前所有操作人员必须将个人事情处理好，一旦进入直至接种完毕中途不得出入，进入缓种间后必须更换工作服、戴工作帽、穿专用鞋，换好后蘸取消毒液将双手洗净，然后同时进入接种室开始接种作业，进入缓冲间和接种室均应注意随手把门关好不留空隙。
　　4、接种操作
　　进入接种间先用75%酒精把手、接种铲、剪刀及工作台面、垫板擦拭一遍并将接种铲、剪刀在酒精灯火焰上进行灼烧，然后可进行以下操作。
　　4.1 将菌种袋棉花塞、套环拔掉用灼烧后的接种铲将料上表面0.5cm左右的菌种刨掉弃之不用，所弃之菌种集中剩放于小桶内，做好后将菌袋倒置，并将袋口上折放于塑料筐内，注意袋口的密封，菌种不可暴露于空气中。
　　4.2 碎化 碎化操作推荐用完一袋处理一袋，也可以一次性将所有菌种碎化，但需注意碎化后的菌种必须密封好。碎化时可采用揉搓等手法，但注意不要弄破袋壁或揉搓过度造成菌丝损伤严重，影响后续发菌。菌种碎化粒度要求其直径不大于0.5cm。
　　4.3 每接完一袋菌种，接种铲必须重新在火焰上进行灼烧一次，特别是接触菌种的部位，灼烧时间应不短于20秒，并有相应的冷却时间，防止接种铲过热烫死菌种。
　　4.4 在菌种使用过程中，袋内菌种少不利挑取时，可用灼烧后的剪刀将菌袋上部剪掉，不可将剩余菌种倒入下一袋。菌种若生有菇芽，应将菇芽挑出弃除。
　　4.5 接种中若发现菌种被污染，应立即将染菌菌种袋口拧紧放于小桶内，并重新对手及接种铲进行消毒。
　　4.6 接种时菌包上的棉花塞要用右手小指和手掌夹住，不可放在操作台上，每个菌包接入三小铲菌种，接种时应一手扶菌包颈部，一手用接种铲挑取菌种接入，菌种应均匀铺满菌包的整个料面，并有不少于一铲的菌种落入接种孔中，接好后将棉花塞在酒精灯火焰上过一遍后塞入菌包。
　　4.7 接种时若发现水包或菌袋破损现象，应挑出不接；若发现菌包正常但棉花塞打湿的，应在接入菌种后，更换预先灭好菌的新棉塞。
　　5、清洁工作
　　5.1 每次接种完毕后均应清理垃圾及接种工具、台面、垫板、小桶、凳子等物件，其上不得留有料屑残渣等物，并用抹布蘸取2%来苏儿溶液擦拭一遍。
　　5.2 地面料屑先用扫帚打扫干净，特别是角落及轨道槽。打扫干净后再用2%浓度的漂白粉或来苏儿溶液拖洗地面，洗净后将明水收干即可。地面拖洗在每天下午接种完毕后进行，上午不进行拖洗，但要将料屑等垃圾清扫干净。
　　6、注意事项
　　6.1 接种室、缓冲间均为无菌区，消毒期间至操作完毕其门不可随意打开，工作人员进出必须统一行动，不可把缓冲间当休息室、聊天室。
　　6.2 进入接种室严禁接打手机、听MP3、大声聊天等做与工作无关的事情，手机在进入接种室前一律关机。
　　6.3 接种室地面必须每天拖洗，墙面每天应擦拭一次。
　　6.4 接种铲应保持干净、光滑，不允许绑扎纤维质或杂菌易栖息的胶布等物。
　　6.5 接种室消毒人员在消毒前应在菌袋之间插入温度计，接种人员进入接种室后由组长负责查看料温，若料温高于25℃应停止接种。
　　6.6 工作服、鞋、帽每星期至少洗涤一次，保持干净整洁。每天接种完毕鞋底的料渣必须刮除干净。
　　6.7 接种室电器设备要定期进行维护保养，电子净化机过滤网及电场每月必须清洗一次，臭氧机过滤海绵每月更换一次，并每天观察电器运行状态，如有故障及时进行修理和更换。并定期进行空间无菌度的检测，确保生产平稳进行。