刘永昶  刘永宝  王德林 刘敏

　　液体制种检验和判断菌种纯度与质量是一项重要指标。以往检验液体菌种质量通常以感观方法，即看、闻、旋来决定菌种质量，大多数人往往由于经验不足难以把握指标，常出现判断困难和失误，给生产带来影响和损失。为解决上述问题，除正确按照生产工艺流程操作外，采取一种快速有效检验方法，早期及时检验液体菌种质量，对保障生产顺利进行至关重要。我们经过多年探索实验和生产实践检验，总结了一种早期及时有效的液体菌种检验方法，简单易行，现将这种方法介绍如下：

　　1、检验材料

　　1.1  土豆200g、葡萄糖20g、琼脂18-20g、蛋白胨5g、水1000ml。将土豆洗净切片加水1000ml，煮沸后10-15min用纱布过滤，取滤液1000ml，加琼脂溶化后加葡萄糖、蛋白胨分装试管内，每管装20ml，塞棉塞，包牛皮纸，高压灭菌121℃-123℃，维持30min，自然降压到零时，打开锅盖，摆成斜面，制作成试管斜面培养基备用。

　　1.2　用250ml三角烧瓶或20×200mm空试管，打好棉塞，包上牛皮纸放入高压锅内灭菌，121℃灭菌30min，冷却后备用。

　　1.3　如果不制作试管斜面培养基，可将每次灭好的菌袋或瓶预留出一筐（12个）备用。

　　2、检验方法

　　2.1　取样 

　　液体菌种检验可分二次进行，第一次在培养24h—36h时取样，第二次在第培养36h—48h时取样。

　　用酒精棉火焰将接种阀灼烧，在火焰保护下接入灭好的三角瓶内或试管中，塞上棉塞，放入接种室。

　　2.2　接种 

　　接种室按常规方法消毒后，打开接种机，点燃酒精灯，在酒精灯火焰保护下将取样的液体菌种，用接种钩挑取菌球或菌液接入试管斜面培养基上，塞上棉塞。

　　如果没有制作或不具备试管斜面培养基，可以用灭好菌的栽培袋或菌种瓶，按前法在接种阀处直接取样接袋或瓶，放入培养室培养。

　　2.3　培养 

　　放入培养室或恒温培养箱内进行培养，温度为28℃—32℃。

　　2.4　观察

　　于培养的24h—36h之间前后观察两次。如菌球萌发变洁白，接种面无红、黄、绿、黑色杂菌，证明液体菌种生长正常，液体菌种生长成熟，后即可使用接种；否则，菌球萌发不洁白，接种面出现红、黄、绿、黑色杂菌菌落，说明液体菌种已污染杂菌。

　　3、总结

　　通过此法检验能在早期判断及时准确有效地掌握液体菌种培养状态，检验液体菌种质量即简便、又快捷，对指导液体菌种的生产应用起到了保障作用，以免盲目接种到大批量栽培袋或菌种瓶中，给生产造成不必要的损失。