摘要 通过对杨树菇液体菌种的碳氮营养需求进行研究，从而得出最佳碳氮源，以及最佳碳氮比组合，为进一步大规模开展杨树菇深层培养提供基础资料。结果表明：杨树菇菌株能利用多种碳氮源，其中碳源以可溶性淀粉较好；有机氮源优于无机氮源，牛肉膏为较佳氮源；较好的碳氮比组合是可溶性淀粉2%和牛肉膏0.5%。
 
　　关键词 杨树菇；液体培养基；不同碳氮源；菌丝生物量

　　1　材料与方法
　　
　　1.1　材料和仪器

　　供试菌种由河南科技大学食用菌实验室保存。试验材料有葡萄糖、蔗糖、硝酸铵、蛋白胨、牛肉膏等；试验仪器设备有气浴恒温振荡器、生化培养箱、超净工作台等。
 
　　1.2　试验方法

　　1.2.1　碳源的比较试验。基础培养基配方：蛋白胨0.5g，葡萄糖2g，MgSO4 0.1g，KH2PO4 0.05g，维生素B1 0.001g，pH值自然。分别用蔗糖（C2）、麦芽糖（C3）、可溶性淀粉（C4）代替基础培养基中的碳源葡萄糖（C1），以葡萄糖（C1）为对照，做4个培养液配方。每个配方做5个重复，取直径0.5cm的杨树菇菌块3块分别接入经灭菌后的200mL三角瓶中，每瓶装营养液100mL。
　　将接好种的三角瓶置于温度为26℃、转速为160rpm的摇床上震荡培养7d。主要观察指标有菌丝的生长速度、菌球的密度、菌球周围有无毛刺等。如果培养液澄清，无异味，含有大量的菌丝球，即可测量菌球干重。
 
　　1.2.2　氮源比较试验。基础培养基配方同碳源，分别用硝酸铵（N2）、硝酸钾（N3）、酵母膏（N4）、牛肉膏（N5）代替基础培养基中的氮源蛋白胨（N1），以蛋白胨（N1）做对照，配制5种培养液。每个配方做4个重复，操作方法同碳源选择方法。
 
　　1.2.3　碳氮组合比较试验。共设6个碳氮组合培养基配方。配方1：可溶性淀粉2%、牛肉膏0.5%、MgSO4 0.1%、KH2PO4 0.05%、维生素B1 0.001%、pH值自然。配方2、3、4分别将配方1中牛肉膏0.5%替换成酵母膏0.5%﹑1.0％﹑1.5％，其他同配方1。配方5﹑6分别将配方1中牛肉膏0.5%替换成蛋白胨1.0%﹑1.5％，其他同配方1。每个配方3个重复，操作方法同碳源选择方法。
　　
　　3　结果与分析
　　
　　3．1　不同碳源对杨树菇菌丝生长的影响

　　3.1.1　菌球长势的观察对比。对菌球形态的观察比较结果见表1。

　　由表1可以看出，C4可溶性淀粉培养液中的菌丝生长速度、菌球大小及菌球密度明显好于其他碳源。
 
　　3.1.2　菌丝干重的对比。对菌丝干重比较结果见图1。

　　由图1可以看出，以可溶性淀粉为碳源的菌丝体干重高于其他碳源，为0.26g/100mL，结合表1可知，较好的碳源是可溶性淀粉。
 
　　3.2　不同氮源对杨树菇菌丝生长的影响

　　3.2.1　菌球长势的观察对比。对菌球形态的观察比较见表2。
 
　　由表2可以看出，N5牛肉膏培养液中的菌丝生长速度、菌球大小及均匀度明显比其他氮源好，可在短时间内获得较多生物量，但其菌球老化快。
 
　　3.2.2　菌丝干重的对比。对菌丝干重的比较结果见图2。
 
　　由图2可以看出，杨树菇菌丝体对有机氮的利用普遍好于无机氮，以牛肉膏为氮源的菌丝体生长最好，与蛋白胨相比，高出0.08g/100mL。综合对表2、图2的分析，蛋白胨还有生长空间。因此，牛肉膏和蛋白胨都是杨树菇菌丝液体培养的良好氮源。
 
　　3.3　不同碳氮组合对杨树菇菌丝生长的影响

　　3.3.1　菌球长势的观察对比。对菌球形态的观察比较结果见表3。
 
　　由表3可以看出，培养基1中的菌丝生长速度、菌球大小、菌丝均匀度、菌球密度明显优于其他培养基，可在短时间内获得较多生物量。
 
　　3.3.2　菌丝干重的对比。对菌丝干重的比较结果见图3。由图3可以看出，培养基1的生物量最多，其碳氮源组合是2%的可溶性淀粉和0.5%的牛肉膏，可以得出培养基1为较好碳氮组合培养基，菌丝体干重为0.39g/100mL。
　　
　　4　结论

　　（1）碳源中根据碳源选择试验，确定较好碳源为可溶性淀粉。从菌丝的整体生长情况比较得出，葡萄糖仅次于可溶性淀粉。
 
　　（2）在5种氮源中，最适氮源为牛肉膏。蛋白胨的效果次于牛肉膏，但以蛋白胨为氮源的培养液内菌球没有出现老化现象，表明菌丝还有生长空间。

　　（3）在6种碳氮组合培养液中，最适碳氮源组合为2%的可溶性淀粉和0.5%的牛肉膏。
　　
　　5　参考文献

　　（略）

□ 朱书伟 吴祖峰 王清华 王宏豪　摘自：现代农业科技