杏鲍菇菌种培养基配方筛选研究
摘要：本文研究了杏鲍菇不同的母种、原种和栽培种培养基对菌丝生长的影响。结果表明，不同配方的各级菌种培养基上杏鲍菇菌丝的生长存在明显差异，其中菌丝生长速度最快的母种培养基为配方6和配方4，而且长势良好，洁白浓密；菌丝生长速度最快的原种、栽培种培养基为配方1（麦粒培养基），但是麦粒菌种成本高，老化快，不耐贮放，而配方7和配方8上的菌丝不仅生长速度快，同时菌种成本低，老化慢，较耐贮放，在生产上更为实用。
关键词：杏鲍菇；菌丝生长速度；菌丝长势；培养基配方筛选
杏鲍菇（Pleurotus eryngii）隶属担子菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属[1]。其子实体菌肉肥厚，质地脆嫩，风味极佳，口感独特，而且药用能提高免疫力，有抗癌，降血脂，润肠胃，美容的效果[2]，早已受到国内外消费者的青睐。我国20世纪90年代开始从国外引种栽培，商业化栽培规模尚小，技术仍不完善，远不能满足市场需求，有广阔的发展前景。目前对杏鲍菇的研究主要限于其生物学特性，菌种选育和栽培技术等方面[2-6]，对生产上杏鲍菇各级菌种配方的研究尚未见报道。而目前生产上杏鲍菇菌种的制备过程中明显存在菌丝生长速度慢、长势弱等问题，本文旨在通过对杏鲍菇各级菌种不同培养基配方的比较研究来探讨生产上适用的杏鲍菇菌种培养基优良配方，从而推动杏鲍菇栽培业的发展。
1 材料与方法
1.1 供试菌株 杏鲍菇3号。
1.2 试验设计
1.2.1 母种培养基配方 本试验初步选择８种母种培养基配方进行比较研究，筛选适合杏鲍菇母种生长的培养基。其中配方1（PDA培养基）为生产上常用的一种通用培养基，作为对照。各培养基配方组成见表1。
表1 母种培养基配方的组成
培养基编号 土豆 棉籽皮 木屑 杏鲍菇出菇料 麸皮 葡萄糖 琼脂 蛋白胨
1 200 20 20
2 200 20 20 5
3 100 100 50 20 20 2
4 100 100 50 20 20 8
5 100 100 50 20 20 15
6 100 100 50 20 20 8
7 200 20 20 5
8 200 20 20 15
注：除配方1外其它各处理中均要加入KH2PO4 3g，MgSO4 1.5g，维生素B1 2片。
1.2.2 原种、栽培种培养基配方 本试验选择8种生产上常用的原种、栽培种培养基配方进行比较研究，筛选适合杏鲍菇原种、栽培种生长的配方，以最为常用的配方4作为对照。各配方组成见表2。
表2 原种、栽培种培养基配方的组成
培养基编号 麸粒 棉籽皮 木屑 麸皮 玉米面 蔗糖 石膏
1 98 2
2 65 33 2
3 87 10 1 2
4 82 15 1 2
5 82 10 5 1 2
6 77 20 1 2
7 41 41 15 1 2
8 82 15 1 2
注：配方1和2中的麦粒前处理：先将麦粒用冷水浸泡12h后水煮，开锅后小火再煮20min左右，使麦粒充分煮透，胀而不破，切开后无白心，用水冷却后沥水摊开，晾干表面水分，将石膏拌入麦粒即可装瓶。
1.3 试验方法
1.3.1 不同母种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响 母种培养基以常规方法配制后进行分装，每个配方5个φ90mm×18mm的培养皿，每皿分装培养基15mL，制成平板培养基，常规灭菌后等量接种（8mm菌丝圆片），然后置于25℃恒温培养箱中培养，每2d标记测量１次菌丝生长量，并把各配方培养基上的菌丝生长情况进行观察比较，当有一种配方的菌丝长满培养皿时，停止试验。
1.3.2 不同原种、栽培种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响 采用750mL的罐头瓶，每个配方分装10瓶，装至瓶肩处，料水比例为1﹕1.3～1.5。按常规方法灭菌后接种，每管母种接4瓶原种，然后置于25℃恒温培养箱中培养，定期观察菌丝生长情况，并记录菌丝长满瓶的天数。
2 结果与分析
2.1 不同母种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响
测定平板培养基上菌丝8d的生长量，算出平均生长速度，并记录菌丝生长情况（见表3）。从表3可以看出：杏鲍菇母种菌丝在8种培养基上均能生长，但是生长速度及菌丝长势明显不同。其中菌丝生长最快的是配方6和配方4，菌丝的生长速度分别达到5.187mm/d和5.156mm/d，而且长势良好；生长最慢的是配方7，菌丝的生长速度只有4.312mm/d，而且长势较弱。Ｆ测验及多重比较结果表明：各配方间菌丝的生长速度存在极显著差异，配方6和配方4上的菌丝生长速度极显著得快于配方1（对照），配方7上的菌丝生长极显著慢于对照，而配方5、8、2与对照间差异不显著。从菌丝的生长速度和生长势综合表现可以看出，生产上最适宜的杏鲍菇母种培养基为配方6和配方4。
表3 不同母种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响及生长速度的差异显著性分析（LSR法）
培养基编号 菌丝生长速 差异显著性 菌丝长势
度/(mm•d-1) 0.05 0.01
6 5.187 a A 菌落边缘整齐，菌丝洁白浓密并扭结成菌丝团
4 5.156 a A 菌落边缘整齐，菌丝洁白浓密并扭结成菌丝团
3 4.968 ab AB 菌落边缘整齐，菌丝洁白浓密
5 4.906 bc ABC 菌落边缘整齐，菌丝洁白
1 4.718 cd BCD 菌落边缘稀疏，菌丝洁白，略显羽毛状
2 4.625 d CD 菌落边缘稀疏，菌丝白，略显羽毛状
8 4.593 d DE 菌落边缘整齐，菌丝白
7 4.312 e E 菌落边缘整齐，菌丝白
注：表中结果为4次重复的平均值。
2.2 不同原种、栽培种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响
研究表明，杏鲍菇菌丝在8种原种、栽培种培养基上均长势良好，但生长速度存在明显差异，菌丝长满瓶的天数及其差异显著性分析见表4，可以看出，菌丝在配方1中生长最快，仅用15.9d就长满培养基，其次是配方7、2、8，其菌丝生长速度也较快，而在配方3和4上生长最慢，长满培养基分别用了26.6d和26.5d。通过Ｆ测验及多重比较表明：配方1、7、2、8、5、6中的菌丝生长速度均极显著地快于配方4（对照），其中配方1、7、2、8中的菌丝长速与配方5、6之间的差异也达极显著水平，而配方3与对照间差异不显著。可见配方1、7、2、8为较理想的原种、栽培种培养基配方，但在实际生产中，由于麦粒种（配方1、2）成本较高，菌丝易老化，不耐贮存，而配方7和8中不仅原材料来源广泛，价格低廉，而且菌种老化慢，较耐贮放。综合考虑可知，麦粒菌种适合于生产上急需时做快速制种，长满后要尽快用完，而配方7、8更适合用于生产上常规原种、栽培种的制备，长速较快，又能短期存放。
表4 不同原种、栽培种培养基对杏鲍菇菌丝生长的影响及差异显著性分析（LSR法）
培养基 长满天 差异显著性
编号 数/d 0.05 0.01
3 26.6 a A
4 26.5 a A
6 25.3 b B
5 24.2 c C
8 19.9 d D
2 19.8 d D
7 19.2 d D
1 15.9 e E
注：表中结果为10次重复的平均值。
3 讨论
3.1 杏鲍菇菌丝生长适宜的碳源及碳氮比（C/N）
腐生型食用菌是食用菌中最大的一群，靠分泌胞外酶分解基质中的有机物而生活，据腐生菌分解的基质不同可分为两大类：木腐生菌和粪草土腐生菌。目前大多数人工栽培的食用菌均属于木腐菌，但许多木腐菌分解木质素的能力并不强，以分解纤维素和半纤维素为主。而杏鲍菇是一种分解纤维素和木质素能力较强的食用菌，生长发育要求丰富的碳源和氮源[4]。兰瑞芳等[5]以杏鲍菇、双孢蘑菇、美味侧耳、茶薪菇、凤尾菇和香菇的新鲜子实体为试材，研究了其中漆酶的活性，结果发现杏鲍菇中漆酶酶活最高。而漆酶在木质素降解中起着重要作用。本研究中发现，以木屑为主料的原种、栽培种培养基（配方７和８）中菌丝生长速度均极显著快于纯棉子皮为主料的，从而也证实了杏鲍菇菌丝确实有较强的分解木质素能力，与其漆酶酶活高相一致。另外，各种食用菌菌丝的生长均需要适宜的C/N，宫志远等[6]以合成培养基研究表明杏鲍菇母种菌丝生长的最佳碳氮源分别为葡萄糖和蛋白胨，适宜的C/N为40:1～70:1，最适C/N为60:1。本研究中用的母种培养基为生产上常用的天然培养基，由于是浸煮液，不能算出较准确的C/N；而原种、栽培种培养基各配方的C/N经计算在25:1～100:1之间，各培养基上菌丝均长势良好，但菌丝生长速度与C/N无相关关系，这可能与菌丝对不同主料的分解程度不同有关。可以利用主、辅原料相同的配方调节其C/N来进一步研究杏鲍菇菌丝生长最适宜的C/N。
3.2 最适宜的原种、栽培种配方
由于原种、栽培种用种量大，占据空间大，很难冷藏保存，而生产上又难以避免原种、栽培种的短期存放，因此，与母种不同，选择适宜的原种、栽培种培养基配方时需考虑多方面因素，除了菌丝的生长速度及菌丝长势外，还应考虑培养基配方中原料的来源应广泛，成本要低，同时要考虑菌种的耐贮性。在本研究中，虽然麦粒种长速最快，但它的成本高，老化快，前处理烦琐，如果时间紧，急需菌种时可选用；而配方7和8中不仅菌丝生长速度快，而且原料成本低，菌种老化较慢，较耐贮存，因此是生产上最适宜采用的原种、栽培种培养基配方。
参考文献：
[1] 黄年来．一种市场前景看好的珍稀食用菌——杏鲍菇[J]．中国食用菌，1998，17（6）：3-4.
[2] 颜明娟，江枝和，蔡顺香．杏鲍菇营养成分的分析[J]．食用菌，2002，24(2)：11-12.
[3] 洪建基，曾日秋，卢川北，等．不同培养料栽培杏鲍菇试验[J]．中国食用菌,2003,22(2):23-24.
[4] 陈为平．珍稀菌蕈杏鲍菇特性及覆土栽培新技术[J]．中国食用菌，2002,21（1）：18-19.
[5] 兰瑞芳，林少琴，林玉满，等．杏鲍菇漆酶的生物学特性[J]．食用菌学报，2002，9(2)：14－16.
[6] 宫志远，于淑芳，曲玲．碳、氮营养对杏鲍菇菌丝生长的影响[J]．中国食用菌，2002,21(3):24-26.
