9.苹果培养基(适于草菇生长):
苹果(压碎) 100克 蛋白胨 2克 蔗糖 20克 琼脂 20克 水 1000毫升
10.高粱培养基(特别适于平菇类生长):
高粱粉 30克 琼脂 10克 水 1000毫升
11.粪汁培养基(供筛选蘑菇菌种):
马厩肥 150克 玉米粉(取汤) 30克 琼脂 20~30克 水 1000毫升
12.酸性培养基(供分离菌种及培养猴头菌):
马铃薯(去皮) 200~250克 糖 20克 琼脂 25克 柠檬酸 1%~5%(灭菌后加人) 水 1000毫升
(三)原种和栽培种培养料的制备
原种是由母种繁殖而来,进而制成栽培种,用于播种、生产。
1.粪草培养基(适于制作蘑菇菌种):
粪草(粪:草=6:4、堆积发酵15~20天) 90斤 米糠或麸皮 8斤 碳酸钙 1斤 糖 1斤 水 适量
2.麦粒培养基(适于制作蘑菇、凤尾菇、毛木耳菌种):
浸湿蒸透的麦粒 88% 木屑 10% 石膏 2% 水 50%一60%
3.木屑米糠培养基(适宜各种木生食用菌的制作):
阔叶树木屑 70%~80% 米糠或麸皮 20%~28% 碳酸钙 1% 蔗糖 1% 石膏 1% 水 调至适量
4.棉皮培养基(平菇、凤尾菇)
棉籽壳 99% 石膏粉 1% 水 适量
5.玉米芯培养基:
玉米芯 99% 石膏粉 1% 水 适量
6.稻草培养基:
稻草 94% 麸皮 5% 石膏 1% 蔗糖 1% 水 适量
7.棉皮木屑培养基:
棉皮 78% 木屑 20% 蔗糖 1% 石膏 1% 水料比为 1.2~1.3:1
8.羊屎培养基(蘑菇):
在侵漉屎中,加入1%~3%碳酸钙或1%石灰。
9.玉米秆粉培养基:
玉米秆 78% 麸皮 21% 石膏 1% 水 适量
(四)棉塞、牛皮纸盖、卫生纸气塞的制作
根据所栽培的品种选择适宜培养基,然后即可将培养基分装。
分装是指琼脂培养基分装和原种、栽培种分装。
装好培养基的试管、三角瓶或菌种瓶,应立即塞上大小适合的棉塞,以防杂菌侵入培养基。所用的棉花、以白色长绒的不脱脂棉花为理想。也可用人造塑料海绵代替棉花作瓶塞,效果很好。棉塞表面要光滑,松紧度要适当。温差变化比较大的地方,棉塞要塞紧一些。
制作棉花塞时,先把棉花铺开,撕成5~6厘米宽的长条,用手握紧,粗度适当,棉塞要稍紧密,塞入后也不能起皱成沟。否则容易掉落,杂菌也容易跑进培养基。
塞好棉塞的空试管,可用烘干箱加热到15℃左右,干热灭菌1小时后备用。
菌种瓶棉塞和试管相同,只是粗细之别。
另外,缺少棉花的地方,可用双层牛皮纸中间加一层棉花作瓶塞。
还可用耐高温塑料纸作瓶塞。目前有些地方的菌种瓶是塑料纸中间打一小孔用胶布封严,接种时只要按操作把菌种放入小孔的办法,也可采用。
母种试管口用卫生纸作透气塞。装好培养基后,试管口擦干净,把卫生纸(普通或高级均可),卷成同试管口一样粗细的筒,剪成5厘米长的小段,每段塞入试管内3厘米,外留2厘米,再扎成捆,用牛皮纸包严、灭菌。接种后还可用塑料胶布将试管口与卫生纸联封。培养按常规办法。
原种瓶或栽培种瓶用卫生纸作通气寨时,先按一定配方装满瓶后,洗净瓶内外壁,把卫生纸剪成5厘米宽条幅,每条卷成同瓶口一样大小的简,塞入瓶内3厘米,外留2厘米;灭菌后接种、培养。
塑料袋制种时,若用"两头"接种,装料后扎紧两头,然后将卫生纸剪成3厘米长、1厘米粗的小卷,用牛皮纸包 严同塑料袋一起装锅灭菌,再放入接种箱消毒,操作时将袋口解开,接入菌种,再将卫生纸小卷夹在袋口中间,用线绳或皮筋扎紧即成。接种完毕后,按常规放入培养室管理。
用塑料袋生料栽培食用菌时,两头可用卫生纸作通气塞。
通过我们多次试验,卫生纸作透气塞,不会像棉花那样湿塞,避免了因湿塞而引起杂菌污染;卫生纸通气性能好、吸水性强、杂菌少,蒸发到瓶口的水珠不易积于料面;以往我们用棉花、塑料环,成本高,工序多,用卫生纸可大大降低成本。
(五)培养基的灭菌
按上述培养基装好后就要立即进行灭菌;将其中的杂菌杀死,然后才能接入我们所需要的纯菌种,进行培养。
不论是母种分离时用的斜面培养基,还是原种、栽培种瓶培养基或聚丙烯塑料袋培养基,一般都采用热力灭菌法。
高压蒸汽灭菌法:若是斜面试管培养基。应先用牛皮纸扎成捆,标明棉塞为上端部分,然后竖直放入高压锅内,进行灭菌。在1.5公斤/平方厘米压力下维持30分钟,即可达到灭菌目的。开锅取试管时,趁热放成斜面。经试验若无杂菌,可用。若有杂菌时,重新灭菌。
灭菌材料如是原种和栽培种,应在15公斤/平方厘米压力保持60~90分钟。这样才能达到灭菌目的。达到所规 定的时间后,应停火并逐渐排去蒸汽。待压力表的指针回复零位时,再把消毒锅的螺栓旋开,打开盖子,取出瓶子。停火排汽时必须注意,排汽阀不能一下子放大,只有一点一点开,让压力表慢慢地回复到原位,然后再揭锅盖。如果排汽过猛,锅内压力急速下降,则会造成棉塞脱落和玻璃容器破损。
常压蒸汽灭菌法:如没有具备高压锅,可用土蒸锅或蒸笼进行。在常压的条件下,以 100℃的温度持续6-8小时,以杀死培养料中的各种杂菌。也可常压间歇灭菌3次。可先蒸1小时,然后隔24小时又如法蒸1次,连续3次,就可达到灭菌目的。
培养基的灭菌效果要经常检验,是否灭菌彻底:一般情况下,灭菌后的培养基最好应放在要培养的温度下,空白培养1周,可检查灭菌效果。如果在这一段时间内培养基没发生任何变化,说明灭菌效果良好,可以使用。