第三章　香菇菌种制作技术

　　香菇菌种的制作是整个生产环节中最为重要的步骤。香菇菌种的优劣会直接影响其产量的高低和品质的好坏。优良菌种包括两层含义：一是菌种本身的种性如高产、优质、抗逆性强、适应性强等遗传性状；二是指菌种应具有纯度高、无虫、无杂质、无污染等特性。因此，获得一个优良菌株是一项十分艰苦、复杂、技术性很强的工作。这项工作一般是由科研部门来完成的，通过杂交、引种、组织分离、诱变等育种措施，筛选出优良菌珠，并经出菇验证和专家鉴定后，方可在生产中推广应用。

　　香菇菌种生产包括培育母种、原种、栽培种三个程序。母种必须是经过一定的出菇试验并经鉴定的优良菌株，是试管种，也称一级种。原种是由母种扩繁接种到木屑或颗粒培养基中培育而成的，也称二级种。栽培种是原种扩大接种到木屑培养基中进行繁殖，以供给大面积生产需求，也称三级种。

　　一、场址选择

　　香菇菌种厂要建立在生产集中、交通运输、水电供应方便、空气清新、厂房周围无污染源、有较宽敞摊晒和存放原材料的地方。

　　二、菌种厂的布局及设备用途

　　1、配料室：是刷洗菌瓶、器具以及用于配料和拌料的工作室。配料室要有上下水道、清洗箱或池子、配料操作台或平整的水泥地面。也可根据生产量购置相应规格的原料搅拌机，用机械拌料更加均匀。配料室的面积，可视菌种日产量来定。

　　2、装料室：是将拌好的菌种培养料，分装在菌瓶或菌袋中的操作室。室内要求有水泥地面。装料室的面积，可根据生产量的机械化程度决定。室内的主要机械是装瓶装袋机。

　　3、灭菌室：是用来给培养料灭菌的地方。设备有常压灭菌锅和高压灭菌锅。农户也可采取自行焊接制作简易灭菌灶，利用塑料薄膜和废弃广告布制成灭菌包进行灭菌。

　　4、冷却室：是灭菌后的培养料瓶或袋降温的冷却间。冷却室室上方设有排气孔。

　　5、准备室：是工作人员更换作业服、检查母种或原种、消毒等一般作业房间。准备室应备有药品柜、器械柜、盆、天平、酒精灯和各种药品等。

　　6、接种室：由隔离缓冲间和无菌操作间组成。隔离缓冲间是接种室的外间，一般长2－3米，宽1米，高1.8－2.2米。内装有波长2537埃、功率30瓦的紫外线灯和日光灯各1支。内放工作服、工作帽、口罩、拖鞋、消毒药品、废物桶等，供无菌操作人员更衣、换鞋及洗手等做准备工作用。无菌操作间是接种室的里间，一般长2－3米，宽2米，高1.8－2.2米，空间太小工作不方便，太大不易保持无菌状态。要求室内密闭、透光；安装有波长2537埃、功率30瓦的紫外线灯和日光灯各1支；有条件的可在隔离墙上设一个双层的小型玻璃窗，便于内外传递物品，减少进出无菌操作间的次数。无菌操作间是扩繁原种、接种母种和栽培种的场所。

　　7、接种箱：与小型无菌操作室相似。木质结构，镶嵌玻璃，关闭严密，便于熏蒸消毒，进行无菌操作。

　　箱的容积以每次接种80－100瓶培养基为宜。箱的内外均要用油漆涂刷，箱内上方装有紫外线灯和日光灯各1支。箱前两个圆筒口装有40厘米长的布套（如套袖），双手伸入箱内操作时，布套的松紧带能紧套手腕处，可以防止外界空气进入。

　　接种箱有许多优点：体积小，封闭性好，较易消毒，相对无菌状态保持时间长；双手在箱内操作，人体不受消毒药物的影响。缺点是箱的容积小，内含氧气少。

　　8、菌种培养室：是用来放置接种后的各级菌种，并提供适宜的温度和通气条件，使菌丝能有较好的生长发育条件的场所。

　　室内装有放置菌种的培养架。室内采用可控式升降温设施，达到恒温控制菌种生长所需的环境。培养室的间数，可依据菌种的生产量而定。室内一定要清洁、干燥、通风、遮光。

　　9、贮藏室：是贮存已培养好的菌种的库房。贮藏室面积视存放量而定。室内温度要求控制在0－7℃，并要求有遮光设施，室内干燥，无其它刺激性气味。

　　三、主要器具

　　1、配制培养基的器具：天平（灵敏度1/10克），小秤，台秤，试管，菌种瓶（500－750毫升）或塑料袋，量杯与量筒，漏斗，玻璃棒，电炉，铝锅，漏斗架，试管架和筐，吸管，平板铁锹，喷壶，棉花和精密试纸等。

　　2、灭菌设备：菌种制作必须采用高压蒸汽灭菌锅。高压蒸汽灭菌锅有手提式、卧式、直立式等种类，用于培养基的高压蒸汽灭菌。通常母种培养基在蒸汽压力达到1.5千克/厘米2，温度126℃时持续灭菌30分钟，但原种和栽培种所用原料是麦粒或木屑，在蒸汽压力达到1.5千克/立方厘米时，灭菌时间为2小时左右。

　　3、接种器具：试管夹架，酒精灯（60毫升），接种钩，接种铲，接种环，解剖刀，培养皿，镊子（长20厘米），搪瓷盘，母种瓶架，消毒棉花，玻璃铅笔，酒精棉球，消毒瓶，小喷雾器等。

　　4、培养设备：电热恒温培养箱，用于母种和少量原种的培养。

　　5、菌种贮藏设备：电冰箱（冷藏箱），要求箱内温度在1－5℃，用于贮藏母种。

　　6、观测器具：生物显微镜，玻璃棒温度计，干湿球温度计。

　　7、主要消毒药品：酒精、气雾消毒盒、来苏儿、新洁尔灭、强氯消毒片、苯酚（石炭酸）等。

　　四、菌种制作

　　1、母种制作

　　由于母种的分离与培养技术要求比较严格，对菌株的筛选、认证周期较长，因此，作为农民实用栽培技术的普及，我们先期不推荐初学者盲目操作。

　　2、原种的制作

　　原种一般开始制作，在袋栽香菇接种期往前推80天左右。具体时间应根据当地栽培季节的先后，分期分批进行。每只母种可扩原种5-6瓶，培育时间40-45天。

　　①、培养基主要配方　a.木屑培养基：阔叶木屑77.5%，麸皮20%，糖1%，石膏1.2%，PH值6.5－7.　b.棉籽壳混合培养基：棉籽壳40%，木屑38%，麸皮20%，糖1%，石膏1.0%，PH值6.5－7。按配方将料水混拌均匀后堆闷一会儿，使料充分吸水。

　　②、装瓶、灭菌、冷却　菌种瓶洗净控干后，装入适量的培养料，要注意瓶内培养基的松紧适宜。将瓶外壁擦试干净，装好料的菌种瓶用棉塞将瓶口塞上，注意棉塞要将瓶口塞紧。没有棉塞时，可用两层报纸外加一层耐高温的聚丙烯塑料膜封口。

　　灭菌过程一定要注意温度的控制，菌种制作一定采用高压灭菌罐进行集中灭菌。在蒸汽压力1.5千克/立方厘米下，2小时左右，就可以达到彻底灭菌的效果。

　　灭菌后的培养瓶在冷却时，注意要缓慢排气进行降温，待灭菌罐内温度至60℃左右，再移至冷却室彻底降温。

　　③、接种　在接种箱或接种室内中接种。接种步骤：先将冷却后的菌瓶按箱内容量放入其中，要留有足够的菌瓶转场空间；将试管母种和接种所需器具一并放入进行接前消毒。点燃气雾消毒物后，将箱（室）及时封闭消毒。接种时在无菌条件下将母种斜面培养基横割成5-6块。第一块要割长一些，因为培养基较薄，易干燥而影响发菌。然后连同培养基移接入原种瓶，每瓶接种一块，且要紧贴接种穴，以利于母种块萌发后尽快吃料定植。

　　④、培养　原种培养室要求清洁、干燥、凉爽。接种后10日内，室内温度保持23-25℃。由于菌丝的呼吸作用放出热量，当室温达到25℃时，瓶内菌温可达30℃左右，所以室温不宜超过27℃。如温度高则菌丝生长差，影响菌种质量。室温超过规定标准时，应加强通风，室内空气相对湿度以70%以下为好。原种培养室的窗户要用黑布遮光，以免菌丝受光照的影响基内水分蒸发，造成原基早现而老化，但要注意空气对流。当菌丝长到培养基的1/3时，随着菌丝呼吸作用日以加强，瓶内料温也不断升高。此时室温要比开始培育时降低2-3℃，并保持室内空气新鲜。20天之后，室温应恢复至25℃为好。

　　在原种培育期间，每天要检查一次菌瓶的四周和棉花塞内有无杂菌感染。一旦发现杂菌感染，就要及时淘汰。经过严格筛选，认为是理想的原种，即用玻璃蜡笔编号，并在原种记录薄上注明代号和母种的来源。原种培育40-45天，菌丝色白、生长粗壮、富有弹性并布满全瓶，即为合格原种。

　　3、栽培种的制作

　　原种再接入同样的木屑培养基上，进行扩大培育出来的菌种，称为栽培种，也叫生产种。晋城栽培种在4-5月份生产。各生产种植户应根据自己的实际生产规模，提前预算安排好菌种的预订计划，以免延误生产周期。

　　栽培种的培养基配方及生产工艺流程与原种基本相同。即：配料拌匀—装袋（袋）灭菌—冷却接种—培育管理—选优去劣—鉴定出品。

　　栽培种好后，可在3－5℃条件下保存。但一般只保存20天左右就要用完，否则，由于菌种菌龄过长，菌丝发育阶段发生变化，将影响栽培时菌丝的培养生长和生殖生长。