大杯蕈[ Clitocybe maxima ( Gartnet Mey ex Fr)quel] , 又名大杯伞、大漏斗菇，隶属担子菌亚门，层菌纲，无隔担子菌亚纲，伞菌目，口蘑科，杯蕈属,自然分布于我国河北，山西，黑龙江，青海等地[1]。子实体群生或单生, 杯状或浅漏斗状, 淡黄色, 肉肥厚, 柄粗, 脆嫩可口, 营养丰富, 素有“笋菇”之称, 是为数不多的发生于炎热夏季的高温型食用菌[2，3]。据析，大杯蕈的蛋白质含量与香菇、金针菇相当或稍高；菌盖中的氨基酸含量占干物质的16.5%以上，其中必需氨基酸占氨基酸总量的45%，高于大多数食用菌，尤以亮氨酸和异亮氨酸的含量最为丰富；菌盖中的粗脂肪的含量高达11.4%，还含有多种人体的必需的矿物元素如钼、锌等，对人体健康十分有利[4]。因此，为更好地驯化栽培大杯蕈，实现其食用价值，本文对大杯蕈菌丝生长发育的最适温度、pH、碳源、氮源等进行了研究，试验结果如下。

　　1　材料与方法

　　1.1　供试菌株

　　大杯蕈（Clitocybe maxima Quel）G98：由山东食用菌菌种场提供。

　　1.2　供试培养基

　　1.2.1 PDA培养基

　　马铃薯（去皮）200克，蔗糖或葡萄糖20克，琼脂粉20克，MgSO4•7H2O 1克，KH2PO4 2克，蒸馏水1000ml，pH自然。

　　1.2.2　碳源培养基

　　0.5% 酵母膏、0.2%KH2PO4、0.2%MgSO4•7H2O、pH自然、分别加入供试的碳源：葡萄糖2.5%，蔗糖2.4%，麦芽糖2.4%，可溶性淀粉2.3%或玉米淀粉2.3%。

　　1.2.3　氮源培养基

　　2%葡萄糖、0.2% KH2PO4、0.2%MgSO4•7H2O、pH自然、分别加入供试的氮源：酵母膏2.8%，蛋白胨1.7%，牛肉膏1.5%，尿素0.43%或（NH4）2SO4 0.94%。

　　1.3 主要的实验仪器

　　平板培养皿、超净工作台、分光光度计等。

　　1.4 试验内容

　　1.4.1　温度试验

　　在PDA培养基的平面上接种大杯蕈，24 ℃培养10 d形成菌落。用直径为9 mm的打孔器取菌丝饼一块，放于平面中央，24 ℃培养24 h后，分别置于15 ℃，20 ℃，25 ℃，30 ℃和35 ℃的恒温培养箱中培养。每隔24 h用十字交叉法测量菌落直径，测量菌丝连续6天的生长长度。每个处理重复4次。

　　1.4.2　pH试验

　　采用不同pH值的PDA培养基、平板培养皿（76mm）培养，pH值设为6.0，6.5，7.0，7.5，8.0等5个处理，每个处理重复4次。试验方法同温度试验。

　　1.4.3　碳源试验

　　采用碳源培养基、平板培养皿培养,供试的碳源分为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉、玉米淀粉等5个处理，每个重复4次。试验方法同温度试验。

　　1.4.4　氮源试验

　　采用氮源培养基、培养皿培养，供试的氮源分为牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、（NH4）2SO4、尿素等5个处理，每个重复4次。试验方法同温度试验。

　　1.5　菌丝生长速度及生长势

　　按十字交叉法测量菌落直径,将菌落平均直径减去供试菌丝圆片直径后除以培养时间计
算菌丝日均生长率,并观察记录菌丝生长势。每个试验重复4 次。采用Duncan 氏新复极差分析方法对各试验处理进行差异显著性检验[5]。

　　2　结果与分析

　　2.1　试验结果见表1。

　　大杯蕈菌丝在15℃—35℃范围内均能生长，15℃、20℃时菌丝长势及生长速度一般；25℃，30℃时菌丝长势旺盛，且30℃下菌丝生长速度很快，与其它温度下差异极显著；35℃时生长极慢。表明大杯蕈生长阶段偏向中温型，菌丝最适生长温度为30℃。

　　2.2　试验结果见表2。

　　大杯蕈菌丝在pH为6.0～8.0均能生长，当pH值为6.0时，菌丝生长速度最快，长势最好，菌丝浓白；pH为6.5时菌丝长势虽好，但是生长速度不如前者；随着pH增加菌丝长势及生长速度都在下降,pH为7.0～8.0时与pH为6.0～7.0时差异显著；当培养基pH为8.0时，菌丝生长明显迟缓，菌丝较稀疏。表明大杯蕈菌丝偏酸性条件下生长， pH 6.0为最佳。

　　2.3　试验结果见表3。

　　大杯蕈菌丝可以利用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉、玉米淀粉等作为其碳源，但是生长趋势不一，说明大杯蕈菌丝对碳源的利用具有选择性。其中蔗糖作为碳源时，菌丝长势及生长速度最好，麦芽糖次之；可溶性淀粉及玉米淀粉作碳源时菌丝差异不显著，但菌丝长势及速度不如前两者；葡萄糖与其它碳源相比有显著差异，菌丝生长缓慢；所以确定蔗糖为最佳碳源。
2.4试验结果见表4。大杯蕈菌丝虽然能够利用牛肉膏、（NH4）2SO4、蛋白胨、酵母膏等作为其氮源，但生长情况不一，说明菌丝对氮源的利用具有选择性。大杯蕈菌丝长势及长速最好的氮源为酵母膏，其后依次为牛肉膏、蛋白胨、（NH4）2SO4，后者作为氮源时菌丝生长明显迟缓；菌丝不能利用尿素生长。确定最佳氮源为酵母膏。

　　3　小结与讨论

　　3.1　试验表明，温度、pH、碳源、氮源对大杯蕈菌丝的生长有明显影响。大杯蕈菌丝生长最适温度为30℃；最适pH为6.0；最佳碳源为蔗糖；最适氮源为酵母膏。

　　3.2　大杯蕈属于高温型食用菌，所以最适生长温度较其它菌类偏高利于菌丝原基生长[3]，菌丝在PDA培养基上30℃生长旺盛，但是在用木屑、棉籽壳等作栽培料时温度过高会失水，影响菌丝的生长，因此，按陈菌琛[6]等提出的菌丝生长温度在25～28℃为宜;菌丝生长的最适pH为6.0与其它食用菌相同生长条件相似；大杯蕈菌丝对碳源、氮源的选择利用与其它食用菌（最佳碳源、氮源通常分别为葡萄糖、蛋白胨）有所差异，本试验验证了这一点。

　　3.3　本试验只是把温度、pH、碳源、氮源作为影响大杯蕈菌丝生长的因素进行初步研究，并未考虑其它生长条件交互作用的影响，因此对大杯蕈生长的营养条件有待于进一步研究。

　　参考文献

　　[1] 陈士瑜. 珍稀菇菌栽培与加工[M]. 北京：金盾出版社,2003.165.
　　[2] 黄清荣, 辛晓林, 刘新海, 等. 影响大杯伞菌丝体及胞外多糖的几种因子的研究[J]. 食品科学, 2006,10(27):174～178.
　　[3] 林爱钦. 大杯蕈生物学特性初探[J]. 福建农业科技,1999,(3):15～16.
　　[4] 彭智华, 龚敏方. 大杯蕈的营养价值及生物学特性研究[J]. 浙江农业学报,1994,(3):156～170.
　　[5] 万鲁长, 黄春燕, 单洪涛, 等. 不同营养条件对白领侧耳菌丝生长的影响[J]. 食用菌学报, 2005,12(4):27～32.
　　[6] 陈君琛, 沈恒胜, 汤葆莎, 等. 大杯蕈高产栽培及加工利用技术[J]. 中国食用菌, 2005, 24(5):32～33.