1 栽培季节及栽培菌株
茶薪菇在天津地区一般都是春秋两季制菌袋,春季在3~4月、秋季在9~10月,每袋装干料0.3~0.35kg,含水量60%~65%,发菌期40~50d,后熟期10d左右,栽培期为1~2个年度。立式出菇,每棚(面积为667平方米)摆放出菇袋5万袋,一般每袋可产鲜菇200~250g,生物学转化率60%~70%。
天津地区栽培茶薪菇所用的水源为地下水,含盐量比较高,有的菌株不能适应。经试验,江西赣州市中兴食用菌研究所的As.b比较适应,产量也较高。
2 茶薪菇母种的制作
2.1 固体母种培养基制备
茶树菇母种可以从有关科研部门引进,也可以自己进行组织培养获得。不管菌种是从何种渠道取得,都必须先经过去杂、提纯、复壮几个过程。母种培养基可以选用PDA培养基,也可选用CPDAVC培养基,茶树菇菌丝在两种培养基上均生长良好。
①PDA培养基:200g削皮去芽眼的马铃薯,琼脂20g,葡萄糖20g,定溶1000mL,pH值自然。
②CPDAVC培养基:新鲜无霉变的棉子皮200g,削皮去芽眼的马铃薯200g,琼脂20g,葡萄糖20g,磷酸二氢钾3g,七水硫酸镁1.5g,VB1,4mg,定溶1000mL,ph值自然。CPDAVC培养基制作方法与PDA培养基类似,只是棉子壳与马铃薯同煮后取过滤液,再加入琼脂20g,完全溶化后再加入葡萄糖20g,磷酸二氢钾3e,七水硫酸镁1.5g,VB1,4mg。
2.2 接种和培养
①接种箱的消毒:接种箱可采用药物消毒(气雾消毒盒或必洁仕复方消毒剂等),消毒40min,也可采用臭氧消毒器消毒40min。
②接种:接种时,试管口不要离开酒精灯火焰四周的无菌区,充分灼烧接种钩并待其冷却后,扒去菌种前部及老化接种块,将菌种斜面上的菌苔纵横划切成米粒大小的小块,稍微带些培养基为宜,然后再取种块迅速放到待接试管斜面的上部,抽出接种钩,烘烧一下试管口,棉塞过火后迅速塞好试管。
③母种的培养:接种后的试管放入23~25℃培养箱或培养室中避光、恒温培养。培养箱、室要提前搞好清洁卫生,并做好消毒工作,采用必洁仕复方消毒剂或臭氧消毒器均可。茶薪菇母种需要14~16d长满试管。
3 原种的制作
3.1 原种培养基配方及制作
①谷粒培养基:谷粒(麦粒、玉米、高粱等)99%,石膏1%。制作方法:谷粒用1%石灰水浸泡12h,煮沸15min,以谷粒不开花、咬开后有白色硬芯为宜,捞出后沥水,摊开略晾一晾,再与石膏拌匀后装入专用菌种瓶或输液瓶至瓶肩处,再装入一薄层棉子壳封口料(棉子壳须提前充分润湿,含水量在60%~65%,目的是减少杂菌污染),用木棒将料略压实,将瓶口内外壁擦干净,塞好棉塞,牛皮纸或双层旧报纸封口,用橡皮筋扎紧。封口后立即装锅灭菌,高温季节装瓶后不超过4h,低温季节不隔夜。高压(0.12MPa、115℃时计时)灭菌1.5~2h,冷却到35℃接种。
②棉子壳、杂木屑培养基:棉子壳62%,硬杂木屑(堆积6个月以上)15%,麸皮18%,糖1%,生石灰3%,石膏粉1%,料含水量60%,pH值自然。制作方法:将上述原辅料加水后充分拌匀,堆闷6~8h后装入菌种瓶,塞棉塞,用牛皮纸或双层旧报纸封口,装好后立即装筐灭菌。高压(0.12MPa、115℃时计时)灭菌2.5h,冷却至 35℃时接种。
3.2 接种和培养
接种应严格按无菌操作要求进行,1支母种可转接4瓶原种。原种培养条件与母种相同,一般需要培养 25~35d菌丝可长满瓶。
4 液体菌种的制作(简易摇瓶法)
4.1 液体菌种培养基配方及制作
12kg削皮去芽眼的马铃薯,切成金桔大小菱形块,加入新鲜菇根3kg,水60L,煮沸计时30min,用6层医用纱布过滤,在过滤液中加入蔗糖1.2kg,磷酸二氢钾72g,七水硫酸镁48g,蛋白胨48g,VB1,240mg,完全溶解后定溶为60L,分装入2000mL平底烧瓶中,每瓶装1500mL,并加一磁子,塞棉塞,用牛皮纸或双层旧报纸包好瓶口,橡皮筋扎紧。0.12~0.15MPa高压灭菌40min,冷却到液面温度为30℃时接种。
4.2 接种和培养
接种箱的消毒:与制作母种时相同。
①接种:接种时,母种试管口和平底烧瓶瓶口要对准酒精灯火焰无菌区(可以用一只大碗作平底烧瓶的支架,将烧瓶倾斜放在碗中),拔下试管及烧瓶的棉塞,用酒精灯火焰灼烧过的接种钩钩取母种种块(略带琼脂培养基,试管母种前部老化部分弃去不要)迅速放入平底烧瓶液面上,使种块漂在液面上,每个烧瓶接入5~6块菌种,棉塞过火后塞好瓶口。1支母种可转接2瓶液体菌种。
②液体菌种的培养:接种后先静置培养48~72h,培养箱或培养室温度为26~28℃,待种块部萌发长出大量新鲜菌丝体时置于磁力搅拌器上培养(动磁场环境),培养温度从28℃逐步降低至25℃,摇瓶的转速先慢后快,茶薪菇一般需要120h即可终止培养。液体菌种既可用作原种转接栽培种,也可直接接种出菇菌袋。
4.3 液体菌种的鉴别
静置培养阶段用眼观察,茶薪菇菌丝体洁白纯正、浓密健壮、丝毛状、生长同步,如果液面上菌种种块带有红、橙、黄、绿、灰、蓝、紫等杂色,即为污染了杂菌。培养过程中,液体培养基颜色由深变浅,培养好的茶薪菇液体菌种呈黄褐色,半透明,菌丝片段既不下沉也不上浮,与液体混为一体,有挂壁现象,如果液体颜色呈灰黄色且混浊则为污染了杂菌。打开瓶塞闻一闻,茶薪菇菌种有一股浓郁的咖啡香味,如有酸、臭、霉等异味则有杂菌。菌球浓度达1000~1500个/mL,经3000r/min离心10min,菌体湿重在20~25g/100mL。
4.4 液体菌种转接栽培种(或出菇袋)接种方法
接种室采用臭氧消毒器消毒40min,用75%酒精棉球将瓶口擦拭消毒,轻轻摇晃培养瓶,使菌丝片段均匀分布于液体中,打开棉塞,将菌种倒入经灭菌冷却后的栽培袋中,尽量使菌种覆盖住整个培养料面。一般每瓶液体菌种可接种约50个栽培袋,每袋接入30mL菌种。
5 栽培种的制作
栽培种培养基配方、制作及接种方法与制原种基本相同,只是采用原种转接,所用的容器除了菌种瓶、罐头瓶外,还可用高压聚乙烯塑料袋加塑料套环。
6 出菇菌袋的制作
6.1 培养料配方
①棉子壳60%,杂木屑18%,麸皮15%,玉米粉5%,CaCO31%,KH2PO4,1%。
②杂木屑39%,棉子壳39%,麸皮10%,玉米粉10%,糖1%,CaCO3,1%。
③棉子壳60%,木屑13%,麸皮10%,玉米粉10%,黄豆粉5%,糖1%,CaCO3,1%。
6.2 装袋灭菌接种
将主、辅料按比例加水后充分搅拌均匀,含水量60%~65%,堆闷1d。采用机械装袋,菌袋用高压聚乙烯塑料袋,规格为17cm×33cm×0.05cm,装料高20cm左右,每袋装干料0.3~0.35kg,尼龙绳扎口,扎口要松紧适度。料装好后立即装筐装锅灭菌,一般用常压灭菌,温度达100℃时计时10~12h,冷却到35℃以下时接种。接种时,用酒精灯火焰灼烧过的接种勺挖出菌种接入栽培袋(弃去菌种表面的一层菌皮),菌袋一端接种,每瓶或每袋栽培种可接出菇袋40~50个。
6.3 发菌培养
发菌棚室要提前喷药消毒杀虫杀菌,此外还要防鼠害。菌袋可地上码放培养,也可上架码放培养,24~26℃室温下40~50d可发满袋。发菌阶段要求暗培养,常温和地通风换气,保持棚室内清洁干燥及适宜的温度。
7 出菇管理和采收
菌丝发满袋后约经过10d左右的后熟培养,即可搬入事先消毒灭虫的出菇棚开袋出菇。立式出菇,开袋后撑开袋口,棚温保持在20~28℃,喷雾状水使棚内湿度达到85%~90%。不久,菌丝从营养生长转到生殖生长阶段,料面颜色起了变化,初期出现吐黄水现象,而后出现深褐色的斑块,接着出现小菇蕾。一般开袋后15~20d开始出菇,从现蕾到采菇需要一周左右的时间。子实体长到八成熟时为采收期,即菌膜未开,菌柄白色,菌盖深褐色。采收时要将整袋的大小菇全部采下,并清除袋内的小菇和死菇。第一潮菇采收完后,向袋中加水,浸泡6~8h(不宜超过24h)后倒掉多余的积水,提高湿度到 90%~95%,如此反复,可采收6~7潮菇。
一般每袋可采鲜菇200~250g。采收后的茶薪菇应及时送入冷库保鲜或加工。(作者:王金枝 郭仲朴 刘瑾 转自:全国科技信息服务网-北京节点)