巴西蘑菇(Agaricus blazei Murrill)又名姬松茸、小松菇,是一种很有开发前途的食、药用真菌。其子实体含有多糖、核酸和甾醇类等多种生物活性物质以及人体必需的多种氨基酸等成分,经常食用,可以降低血压、降低胆同醇,且对肿瘤、痔疮、神经痛等具有一定疗效。我国于20世纪90年代初从日本引进姬松茸菌种,近年在福建、四川、湖北等地有一定规模的栽培,其生产用种多为麦粒种、发酵粪草种或发酵棉籽壳种。生产上多以发酵粪草料为主,采用大棚层架式或地床式栽培,而采用熟料栽培的报道不多。栽培产量的报道一般存5.0~6.5 kg/ m2,倪新江等报道了采用发酵棉籽壳、麦草、粪肥等栽培的产量达9.4 kg/ m2。近年来.我国乐动体育热门赛事
的工厂化发展趋势渐行渐盛,探讨适合工厂化栽培巴两蘑菇的生产技术也将日益迫切。本文尝试用泥炭土为主料制作菌种并以熟料标准箱式栽培进行试验,旨在探寻适应巴西蘑菇工厂化栽培需要的技术路线。
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试菌种为姬松茸ABM一3号试管保藏种.引自华中农业大学菌种实验中心。泥炭土选用敖珠牌,由吉林吉祥泥炭有限公司生产。
1.2 培养基质制备
1.2.1 加富PDA(/L)
麸皮50 g煮沸30 min的浸提汁液,加入PDA中。用于菌种保存和扩大培养。
1.2.2 麦粒种麦粒经2%石灰水浸泡一夜后煮至无白心,沥干表水,拌入2%石膏粉,121℃灭菌4 h,用于制作原种。
1.2.3 栽培种制备
A:麦粒种制作方法同原种。
B:发酵棉籽壳菌种,将棉籽壳事先堆制发酵1周(棉籽壳200 kg,按料水比1:1.3加2%石灰水,建成宽1m、高0.8~1.0 m,长度依料量,自热发酵1周,其间翻堆3次:一般第3天堆温达到60℃以上即可翻堆,第5天和第6天各翻堆一次。发酵好的料堆上长满白色放线菌,棉籽壳棕褐色、用手捏有1~2滴水滴出,无酸臭味道)后晒干,配制时发酵棉籽壳78%、麸皮20%、石膏1%、蔗糖1%、石灰调pH至7.O,加水调含水量60%。
C:棉籽壳菌种,未发酵棉籽壳78%、麸皮20%、石膏1%、蔗糖1%、石灰调pH至7.O,加水涮含水量60%。
D:泥炭土菌种,泥炭土(过1 cm直径筛)78%、棉籽壳10%、麸皮10%、石膏l%、蔗糖1 %、按料水比1:1.2~1.3加水混合翻拌,使培养料吸水均匀,含水量约60%。
1.2.4 栽培料制备
按每100 kg棉籽壳添加10 kg谷壳,10 kg牛粪,1 kg石灰,1 kg石膏,然后分别添加0、5、10、20 kg麸皮配制成1、2、3、4几种不同培养料,每种培养料先将其中棉籽壳、谷壳和牛粪混合按料水比1:1.3加水,建堆发酵1周,其问堆温达到60℃以上后分别在第3天,第5天,第6天翻堆3次;然后按量分别称取麸皮、石膏和石灰,混拌均匀后适当加水,调整到用手捏有1~2滴水滴出,调整培养料pH值为7.0。
1.3 不同基质栽培种比较
4种不同栽培种基质分别采用聚丙烯菌种袋(15 cm×30 cm×0.4 mm)分装,每袋合干料约0.25 kg,装袋饱满、松紧适宜,颈圈封口,除麦粒种外,其它基质121℃灭菌2.5 h;分别接人原种约15 mL,25℃暗培养至菌丝长满。
菌丝培养过程中,采用划线法每周测量菌丝在菌袋中的生长长度,依此测定菌丝平均生长速度;观测菌种满袋时间、菌丝生长情况,并分别接种至栽培试验培养料中进行播种萌发定植情况观察。依此比较评价不同基质的栽培种的质量优劣。
1.4 出菇实验
配制4种栽培料,分别装入17 cm×36 cm×0.3 mm聚乙烯折角袋,每袋合干料0.5 kg,装袋饱满、松紧适宜,颈圈封口,121℃灭菌2.5 h;自然冷却至室温,接人约15 mL泥炭土栽培种;25℃暗培养。分别从4种栽培基质处理中随机取未染杂、菌丝长满的菌袋,脱去包装袋,从中间切成两半,断面朝上放入塑料标准箱(57 cm×36 cm×18 cm),每箱10袋切断后竖立并排摆放,表面均匀覆盖3 cm厚泥炭土。每种栽培基质5个栽培箱。
喷水调覆土含水量至20%以利菌丝上土,当覆土表面冒菌丝时应及时补加泥炭土覆盖,现蕾后给予喷雾增湿,并注意适时通风换气,保持空气清新。子实体菌盖开伞前(8~9分成熟)及时采收。以标准箱为单位统计三潮菇的鲜菇产量、转潮时间等,按公式计算产量:标准箱的单位产量(kg/m2)=每标准箱三潮鲜菇重(kg)/标准箱面积(0.205 m2)。
数据处理采用SPSSl3.0统计软件中的方差分析(ANOVA)和Duncan’s新复极差检验法,分析试验中各处理间的差异显著性。
1.5 产品镉含量检测
从采收的子实体中随机取样2份,每份鲜重50 g,送湖北出入境检验检疫局检验检疫技术中心,石墨炉原子吸收光谱法检测产品镉含量。
2 结果与分析
2.1 不同基质栽培种比较
4种基质的栽培种生长情况如表2,由实验结果可知,未发酵棉籽壳(C)不宜用作栽培种基质,其余几种基质中菌丝生长速度差异不明显,而从菌丝生长状况看,泥炭土基质(D)较传统的麦粒基质(A)稍好,加之泥炭土基质的栽培种易于保存,菌丝不易老化(见封三图1),可以在生产中方便应用。
2.2 不同配方培养基的出菇产量比较 4种不同配方的培养料熟料栽培巴西蘑菇的出菇和转潮时间及各潮次产量归纳如表3。
由表3可知,4种不同配方的栽培料中,2号配方的产量最高,单产水平与文献报道的最高水平相同;而且出菇和转潮快,主要产量集中在前两潮菇,比较适合工厂化生产的要求。1号和3号配方表现稍差,4号配方最差。
2.3 镉检测结果
检测结果显示:2份随机样品的镉含量分别为0.34 mg/kg、0.50 mg/kg,两个数据的平均值是0.42 mg/kg,低于国家标准(<0.5 mg/kg)。由于巴西蘑菇菌丝具有富集镉的特性,常因实体镉含量易超标而达不到出口标准。本试验以棉籽壳为主料采用熟料标准箱式栽培巴西蘑菇,产品质量合乎国家质检要求。
3 小结
采用泥炭土制作巴西蘑菇栽培种具有操作简便、成本低廉的特点,且灭菌时间相对较短、成品率高,菌种的保存期可长达60 d,值得在生产中推广应用。
本实验尝试了以棉籽壳为主料的巴西蘑菇熟料标准箱式栽培,取得与广泛使用的发酵料栽培生产水平相当的培养料配方和相应的栽培方式,这种尝试为巴西蘑菇工厂化生产提供了新的可能模式。结合一定的生产原料控制,可保证产品符合国家质量安全要求。
周全,唐兴国,黄振兴,宋鹏飞,周骏江(武汉生物工程学院生物工程系,湖北武汉430415) 食用菌学报2010(2)